大肠杆菌培养基,大肠杆菌培养基配方
导读:大肠杆菌O157:H7显色培养基(CT-SMAC 平板)(国标首选)HiCrome™ MacConkey Sorbitol Agar Base原理麦康凯山梨醇琼脂培养基 是根据Rappaport和Henigh的文献描述而制备的[1]。培养基
大肠杆菌培养基,大肠杆菌培养基配方大肠杆菌O157:H7显色培养基(CT-SMAC 平板)(国标首选)
HiCrome™ MacConkey Sorbitol Agar Base
原理
麦康凯山梨醇琼脂培养基 是根据Rappaport和Henigh的文献描述而制备的[1]。培养基中含有山梨醇和BC指示剂,不含乳糖。用于鉴别大肠杆菌O157:H7肠道病原菌。
大多数大肠菌群菌株 会发酵山梨醇,产生酸。当pH值低于6.8时,培养基中的中性红会变成粉红色。同时普通大肠杆菌具有ß-D葡萄糖醛酸酶,当遇到培养基中BC指示剂时,会呈现蓝绿色。当两种颜色叠加时,普通大肠杆菌在此种培养基中,最终会呈现蓝紫色。
大肠杆菌O157:H7不发酵山梨醇[2],也不具备ß-D葡萄糖醛酸酶活性[3],因而在此种培养基中产生的菌落为无色。
March和Ratnam报告[2],山梨醇麦康凯琼脂培养基对大肠杆菌O157:H7的检测具有100%的敏感性和85%的特异性,该培养基可作为筛选大肠杆菌O157:H7的可靠手段。
此培养基中:碳源、氮源及其它必要的生长营养素,由酪蛋白酶解产物和䏡蛋白胨提供;结晶紫和胆盐会抑制大多数革兰氏阳性菌生长;培养基中的氯化钠维持渗透压平衡。
如果需要,此培养基还可添加 碲酸盐头孢克肟添加剂(货号:FD147),可使培养基更具有选择性[4]。亚碲酸钾可使大肠杆菌O157选择性生长,并抑制嗜水气单胞菌和普罗维登菌的生长;头孢克肟可抑制变形杆菌。
注:假单胞菌在此培养基中也可产生无色菌落。若需对可疑菌落辨别,可进行氧化酶试验,在5-10秒内观察结果。
应用
HiCrome™麦康凯山梨醇琼脂培养基推荐用于从食物和动物饲料中选择性分离大肠杆菌O157:H7。
培养基成分
成分g/L
酪蛋白酶水解物17
䏡蛋白胨3
山梨醇10
胆盐混合物1.5
氯化钠5
结晶紫0.01
中性红0.03
BC指示剂,01
琼脂13.5
最终pH(25℃)7.1±0.2
配制
在495ml蒸馏水中溶解25.06克,加热至沸腾以完全溶解。15磅灭菌(121°C)15分钟。冷却到45°C。混匀,倒入无菌培养皿。
如果需要添加液态碲酸盐头孢克肟添加剂(货号:FD147),在无菌培养基冷却前添加。
质量控制
● 外观——浅黄色至粉红色,单一*流动粉末
● 成胶性——牢固,可与1.35%琼脂凝胶相媲美
● 制备好的培养基的颜色和透明度——在培养皿中为紫红色、澄清并稍不透明的凝胶形式
● 配比浓度——5.01%w/v(5.01g/100ml水)水溶液在25°C下pH为7.1±0.2
● pH值——6.90-7.30
培养结果
5-37°C孵育18-24小时后观察培养特征(如有必要,可延至48小时)。
参考文献
1.Hansen W. and Yourassawsky E., (1984), J. Clin. Microbiol., 20:1177.
2.Karmali M.A., Petric M., Lim C., et al, (1985), J. Infect. Dis., 151-775.
3.Thompson et al. (1990). J. Clin. Microbiol. 29, 2165-2168.
4.Zadik P.M., Chapman P.A. and Siddons C.A., (1993), J. Med. Microbiol., 39, 155-158.
产品引用文献
1. Sreepriya Prakasan, Parmanand Prabhakar, Manjusha Lekshmi, Sanath Kumar,Binaya Bhusan Nayak.Isolation of Shiga toxin-producing Escherichia coli harboring variant Shiga toxin genes from seafood.Vet World. 2018 Mar; 11(3): 379–385.
2. SK Manna, C Manna,et al.Serogroup distribution and virulence characteristics of sorbitol-negative Escherichia coli from food and cattle stool.Journal of Applied Microbiology, 2010, 108 (2) :658–665
3. KM Mbae,MK Ndwiga,FG Kiruki.Microbiological Quality of Kachumbari , a Raw Vegetable Salad Popularly Served Alongside Roast Meat in Kenya.Journal of Food Quality,2018,(35):1-7
总结:以上内容就是对于大肠杆菌培养基,大肠杆菌培养基配方的详细介绍,文章内容部分转载自互联网,希望对您了解大肠杆菌培养基有帮助和参考的价值。